微生物法测定维生素B12，要用优质培养基

维生素B12，是人体必需维生素，在维持机体正常造血和神经功能健全中起到至关重要的作用。因此，对于婴幼儿配方乳品和营养补充食品中，测定维生素B12十分必要。

我国《GB 5413.14—2010食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中维生素B12的测定》规定了采用莱士曼氏乳酸杆菌（ATCC 7830）测定维生素B12的整个流程。实际亦有多篇报道，肯定了微生物法的准确可靠，并且测定样品还包括肠内营养粉剂、多维元素片、维生素饮料以及含乳饮料等［1-4］。

微生物法的原理是，根据试验菌株对微生物B12的特异性和灵敏性，在含有除维生素B12以外所有营养的【测定培养基】中，加入标准曲线工作液以及未知待测样品溶液，根据微生物生长产生的透光率，对待测样本中微量的微生物B12进行测定。

其中，测量的准确度尤其依赖于维生素B12在一定浓度范围内与透光率呈现良好的线性关系。而是否呈良好的线性，又与所用的【测定培养基】有很大的关系。有机构采用了不同品牌的【维生素B12测定培养基】进行测定，发现两个国产品牌培养基的接种空白依然有生长，勉强可获得标准曲线，但线性结果不理解。而进口品牌的“标准曲线明显梯度正生长, 获得较理想的标准曲线, 线性结果较理想”［5］。

参考文献

1. 蒋孟虹，许苹，秦峰，刘浩，杨美成. 微生物法测定肠内营养粉剂中微量维生素B12的含量［J］.食品安全质量检测学报,2016,7(3):893-897

2. 卢京光，裴琳，杨龙华．在线微生物浊度法测定多维元素片中微量维生素B12的含量[J]．药物分析杂志,2011,031(009):1837-1839

3. 陈亚波，周敏，杨彤．微生物法测定维生素饮料中的维生素B12[J]．浙江农业科学，2013,000(007):863-865

4. 林耀文，佘之蕴，李姣，苏妙仪，范安妮，张施敬，王力清．微生物法测定含乳饮料中维生素B12含量[J]．饮料工业,2013,016(004):39-42

5. 陈绪华, 刘健, 江一飞. 不同测定培养基对维生素B12线性的影响[J]. 生物技术世界, 2013(04):53+131

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生产工艺均通过WHO-GMP、ISO9001、ISO13485认证，

【维生素B12测定培养基】在CE和FDA具有注册登记。

产品信息

中文：维生素B12测定用培养基

英文：Vitamin B12 Assay Medium

品牌：HiMedia®

规格：100G/瓶

货号：M036

储存温度：8℃下密闭保存，理想是放置于干燥器中。

质控

该产品出厂前经厂家严格检测，确保合格后方予放行。具体质控包括：

外观（粉末颜色、均一度、是否结块）

溶水后的培养基颜色和透明度

pH值（8.5% 水溶液，25℃）

培养反应（对莱士曼乳酸杆菌ATCC 7830 在35-37℃培养18-24小时）

生长试验（用美国药典维生素B12标准品，每管分别加入0.0,0.025,0.050,0.075,0.1,0.125,0.150和0.2ng，观察菌株的连续生长状况，在620nm测定吸光度）

（注：分别为对照，空白，标准品1，标准品3，标准品5）

优势

该产品不含痕量维生素B12，有效避免标准曲线偏移和本底过高，结果准确可靠。