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简析透析胎牛血清的应用

更新时间:2020-08-24  |  点击率:851

胎牛血清常用于细胞培养。但有一些实验则需要透析胎牛血清。

 

下面小编就来和大家讲一下透析胎牛血清。

 

透析胎牛血清和胎牛血清的唯yi区别是,前者透析祛除了分子量在1万以下的小分子,如葡萄糖、盐、氨基酸、激素,此外在其他工艺方面没有任何区别。

透析胎牛血清也是用于细胞培养,但同时,又有自己的一些特殊应用。其用途可归纳如下:

 

一、掺入研究

例如:有人研究呼吸道合胞病毒的宿主特异性:即为什么它只感染呼吸道上皮细胞,而不感染其他细胞。

他们将该病毒的F蛋白(融合蛋白)序列克隆入质粒内,并转染293T细胞。转染后第20小时,细胞先在不含蛋氨酸和半胱氨酸的DMEM+透析胎牛血清中培养了45分钟(让细胞处于饥饿状态,因培养基中缺少氨基酸),再在同样上述培养基中培养,但添加了35S标记的蛋氨酸和半胱氨酸。

 

培养4小时后进行分析。即裂解细胞后,用抗F蛋白的抗体捕获F蛋白、跑胶并进行放射自显影,分析F蛋白的表达情况。发现F蛋白的表达确实增加了,但突变后的F蛋白表达却无任何变化。结果证实,野生型的F蛋白确实参与病毒对宿主细胞的侵袭。

 

值得指出的是,用35S标记的蛋氨酸和半胱氨酸用来标记细胞内的蛋白,结合免疫沉淀用于观察在某一过程中发生的某一蛋白的变化,从而发现该蛋白所扮演的角色,的确是一个普遍有效的方法(在研究信号分子磷酸化的方面,则需要使用32P标记的磷酸盐)。

 

在这其中,透析胎牛血清的使用*,即给细胞创造一个无外源氨基酸干扰的环境。

 

二、细胞水平的药物筛选

例如:有人要从化合物库中筛选S1P4受体的拮抗剂,以抑制流感病毒带来的免疫激活导致的肺损伤。他采用报告基因进行监测。为了避免细胞培养环境中存在的小分子的干扰,他也需要用10%的透析胎牛血清加McCoy's 5A培养基来培养细胞。

 

类似在药物研发过程中,采用特定启动子操纵的荧光素酶报告基因,基于细胞平台的高通量药物筛选,也都需要无外源小分子的培养体系,因而也要用透析胎牛血清。

 

三、细胞克隆的筛选

包括杂交瘤细胞和CHO细胞等,由于在进行细胞筛选时,需要无外源小分子如次黄嘌呤和胸腺嘧啶等的干扰,因此也需要用到透析胎牛血清。

目前市面上有一款低调的透析胎牛血清进口品牌Ausbian。它在近些年备受实验人员青睐。下面给您介绍一下:

 

中文名:Ausbian®透析胎牛血清

英文:Fetal Bovine Serum Sterile Filtered, Dialyzed

品牌:Ausbian®

产地:澳洲

货号:VS100TZ,VS500TZ

批号:见瓶身

规格:100ml/瓶,500ml/瓶

Ausbian®透析胎牛血清为澳洲进口,是在当地政府兽医部门的监督下从注册的出口屠场采集,GMP品质生产,严格质控,符合动物协会要求。

 

产品描述

1.在Ausbian®特级胎牛血清基础上,透析过滤去除10KDa以下小分子,避免外源小分子对细胞的干扰。

2.精选内毒素更低批次,细胞更健康。

3. 每个批次提供完整的检测报告。

4.全程冷链运输,不出现冻融现象,保证质量不受影响。

5.100毫升,500毫升多种包装选择,适合不同实验用量需求。

6.国内现货储备,避免货运风险。

 

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