背根神经节是位于脊椎间孔内、靠近脊髓的神经结节。它负责向脊髓传递各种感觉信号,如温度觉、触觉、痛觉等。
背根神经节细胞的体外培养可用于研究神经轴突再生,从而有助于脊髓损伤的治疗。
在研究神经轴突再生机制时,电穿孔转染siRNA 或质粒是一种重要的研究方法。
对于神经元细胞,电传孔转染效率显著高于其他方法,但对细胞可能有一定损伤。
2020年9月,《中国组织工程研究》期刊在线发表了《无血清培养基和有血清培养基对背根神经节生长的差异》的研究,揭示出在电转条件下,血清对背根神经节的体外培养有重要作用,因此无血清培养基无法取代有血清培养基。
该研究即将刊登在2021年第13期的纸质版期刊上。
研究人员取出小鼠的背根神经节组织,用胶原酶消化后,分别用含5%胎牛血清的MEM培养基和无血清的MEM培养背根神经节细胞。
同时,用电传孔方法转染增强型绿色荧光蛋白(EGFP) 质粒至细胞内。
培养3天后,观察在光镜下观察细胞形态及生长状况,并进行神经元标志物染色,在荧光显微镜下观察,并测量轴突长度。
结果显示:
1、在电转和非电转条件下,无血清并不影响背根神经节细胞的轴突再生的长度和轴突的分支。
2、在电转的条件下,背根神经节神经元的存活数均减少,且电转无血清组的细胞存活数比电转有血清组明显减少。
3、无论是否有血清,电传孔传染效率均为20%左右。
该研究揭示出,电转对神经细胞存在一定的损伤,但血清对细胞有明显的保护作用。该结论也可能适用于其他细胞类型。
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