抗老有新招~延缓干细胞衰老的秘密（细胞培养fbs作用）

生物钟作为机体的的生物计时系统，负责将哺乳动物的生理和行为周期与外界的昼夜节律同步，从而维持机体稳态。干细胞老化是机体衰老和退行性疾病的重要标志。

近年来的研究表明，生物钟与衰老过程密切相关。但是，衰老是如何影响生物钟？核心节律蛋白又是如何调节衰老过程？这些问题仍尚不明确。

2020年7月31日，中国科学院动物研究所和中国科学院北京基因组研究所的团队在 《Cell Research 》在线发表题为 Stabilization of heterochromatin by CLOCK promotes stem cell rejuvenation and cartilage regeneration 的研究论文。研究发现，核心节律蛋白 CLOCK 可延缓干细胞衰老并促进关节软骨再生。

 

DOI: 10.1038 / s41422-020-0385-7

CLOCK是哺乳动物生物钟的核心组成成分，可调节生物钟相关基因的转录。CLOCK单核苷酸多态性与肥胖、糖尿病、阿尔茨海默病等有关。既往研究表明，CLOCK敲除小鼠寿命缩短，并伴有白内障、皮炎等衰老相关疾病的发生。然而，CLOCK调节衰老的具体分子机制和靶点尚不明确。

研究人员发现，在老化的人类间充质干细胞（hMSC）中，CLOCK的表达降低，提示CLOCK可能参与调节hMSC衰老过程。此外， CLOCK缺陷的hMSC中昼夜节律激活受损，并出现加速衰老的表型；将CLOCK重新回输到CLOCK缺陷的 hMSC中，可以恢复其昼夜节律异常，逆转hMSC衰老。

 

CLOCK缺陷的hMSCs呈现出加速衰老的表型

随后，研究人员利用HEK293T细胞研究CLOCK缺失加速hMSC衰老的分子机制。有趣的是，在CLOCK蛋白复合物中发现了异染色质相关蛋白KAP1。免疫共沉淀实验证实了HEK293T细胞和hMSCs中CLOCK与异染色质相关蛋白之间存在相互作用。近一步的研究表明，CLOCK是hMSC的异染色质稳定剂，通过与核膜和异染色质相互作用来调节hMSC的衰老。

 

CLOCK与核纤层蛋白和异染色质相关蛋白KAP1形成复合物

后，研究人员发现，在老龄化小鼠关节中CLOCK表达降低。将编码CLOCK的慢病毒注射到小鼠的膝关节腔中，可降低膝关节中衰老细胞的比例，缓解与衰老相关的关节炎症并刺激软骨发育，终改善运动能力。

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来源：生物探索

胎牛血清，是由胎牛血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物，含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，其组成成份大部分已知，但还有一部分尚不清楚，这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。其中不含细胞、纤维蛋白和凝血因子。

 

胎牛血清 在细胞培养中的作用：

1. 提供对维持细胞指数生长的激素，基础培养基中没有或量很少的营养物，以及主要的低分子营养物。

2. 提供结合蛋白，能识别维生素、脂类、金属和其他激素等，能结合或调节它们所结合的物质活力。

3. 有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合，起到解毒作用。

4. 是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。

5. 起酸碱度缓冲液作用。

6. 提供蛋白酶抑制剂，使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活，保护细胞不受伤害。

7. 参与细胞冻存。

在细胞培养中，胎牛血清加入基础培养基的浓度大多为5%～20%（常见为10%）的。具体到不同试验，应依据文献报导，或细胞类型或基础培养基的成分来确定浓度。

胎牛血清应在-20℃储存，运输应干冰冷链运输，避免反复冻融，确保血清中因子活性不受影响，保证血清优良品质。