培养细胞最头疼的就是被支原体污染了......

在细胞培养过程中，支原体感染发生率达到63%，因而细胞培养过程中被支原体污染是一个世界性的难题。细胞培养中常遇见的有细菌污染、真菌污染、支原体污染、病毒污染等。说起支原体污染，估计细胞培养的同学就开始犯愁了，细胞培养的老手都知道，支原体污染非常不易察觉。有的实验室被支原体污染后，如果不进行有效*的支原体清除，该实验的细胞培养很难进行下去，细胞传代3代以后状态就急剧下滑，无法进行正常实验，有的实验室甚至只能指望换细胞间。那么怎样才能有效检测并清除支原体污染呢?

支原体污染的来源包括工作环境的污染、操作者本身的污染（一些支原体在人体是正常菌群）、培养的污染、污染支原体的细胞造成的交叉污染、实验器材带来的污染和用来制备细胞的原始组织或器官的污染。细胞培养工作中，主要从以下几个方面来预防支原体的污染：控制环境污染；严格实验操作；细胞培养和器材要保证无菌；在细胞培养中加入适量的抗生素。

如果受到支原体污染时，细胞形态较之无明显变化，极易被忽视，往往直到污染非常严重时才能发现。受污染的细胞膜上可能有几百个支原体，这些支原体竞争营养并释放有毒的代谢产物，严重影响实验结果。

对于费力扩增的细胞（如已转染，或经过体外刺激），如果细胞中发现有支原体污染，但此细胞又不愿丢弃，希望继续培养，推荐使用MB公司生产的专li复合抗生素Zell Shield®。

注意：

①每次使用Zell Shield®之前，务必先用厂家推荐的“悬浮冲洗法"处理细胞，这样才能达到最佳的支原体祛除效果。

②在祛除细胞支原体污染的过程中，需要环境、试剂及耗材确保洁净，无新的支原体污染加入。只要如法操作，在使用Zell Shield®四代后，细胞中的支原体即可祛除。

特点

1) 高效广谱。Zell Shield®通过阻止支原体、真菌、霉菌、致命病菌增殖过程中DNA及蛋白的合成，有效抑制上述微生物的增殖。

2) 安全。无细胞毒性，专li复合支原体敏感抗生素，对大多数细胞株无毒。

3) 活性稳定。在细胞培养期间，Zell Shield®始终保持稳定的活性。

4) 使用方便。Zell Shield®为无菌溶液，可直接加入培养基使用。

用法

1) 在每次使用Zell Shield®之前，细胞传代时，先使用厂家推荐的“悬浮冲洗法"处理好细胞，再使用加了Zell Shield®的培养基养细胞，能达到最佳的祛除支原体的效果。（“悬浮冲洗法"的详细步骤，见下一页）

2) Zell Shield®常规为-18℃保存，建议使用前，先融化分装，仍旧-18℃避光保存，使用时按需融化配置。避免反复冻融。

3) Zell Shield®按1:100浓度可直接加入培养基。例如：500ml培养基中添加5ml Zell Shield®，50mL/瓶的Zell Shield®可供5L培养基使用。