在细胞培养过程中,支原体感染发生率达到63%,因而细胞培养过程中被支原体污染是一个世界性的难题。细胞培养中常遇见的有细菌污染、真菌污染、支原体污染、病毒污染等。说起支原体污染,估计细胞培养的同学就开始犯愁了,细胞培养的老手都知道,支原体污染非常不易察觉。有的实验室被支原体污染后,如果不进行有效*的支原体清除,该实验的细胞培养很难进行下去,细胞传代3代以后状态就急剧下滑,无法进行正常实验,有的实验室甚至只能指望换细胞间。那么怎样才能有效检测并清除支原体污染呢?
对于低流行地区,PCR检测人员经过严格培训上岗后,核酸污染的风险相对较小,但在疫区超负荷工作时,就可能会遇到核酸污染的问题,可通过以下措施降低污染机会:
1.正确佩戴手套:手套未紧密贴合拇指、食指和中指,在进行开盖操作时容易发生交叉污染。
2.正确使用生物安全柜:简单、整洁、避免通风口堵塞;操作前后紫外线照射,消毒剂随手可及;废液缸里有1/3体积的含氯消毒液,并且及时清理废液缸,保证废物不超过废液缸体积的2/3。
3.核酸提取仪去污染:每天多批次检测时,在每一批次检测完以后必须用75%的乙醇和核酸去除剂对仪器进行去污染。
4.重视通风:不定期对房间进行通风,每次至少持续30min。
5.PCR扩增区去污染:PCR反应管必须盖紧,避免扩增后的核酸对环境的污染。
6.实验室随手可及的消毒剂。
有没有什么方法能够简单高效地祛除DNA污染呢?
当然有:Minerva Biolabs PCR Clean™
通过中和以及降解的原理,可快速有效地祛除任何物体表面的DNA、RNA以及DNA酶、RNA酶的污染,使它们快速的降解,从而确保PCR实验结果的准确。
使用方法也十分简单:
将PCR Clean™喷在操作台表面,反应1分钟后,即可用干净纸巾擦干试剂。
注:如果没有擦拭干净,液体挥发后表面可能有白色残留,影响美观。此时可用喷壶喷洒蒸馏水到白色残留处,然后擦拭即可。
针对移液器需要去除DNA污染,可按照说明书拆开移液器,将杆轴浸泡在PCR Clean™喷雾剂中,1分钟后取出后用水冲洗,晾干,重新组合。
PCR Clean™的优点:
1、快速:1分钟起效。
2、方便:喷雾剂可直接使用。
3、保护实验人员,避免接触DNA污染。
4、稳定性强:PCR Clean™耐热,可在室温保存至少一年。低温可能会形成沉淀,但在37℃迅速溶解。即使在65°C条件下存放两周,也不会影响喷雾剂的祛除效果。
5、成分安全:PCR Clean™含有少量的磷酸和乙氧基醇,成分非碱性,无致癌性。