一、牛血清的主要成分
牛血清是一种成分复杂的混合物,其大部分成分已为人所知,但还有一部分仍不清楚,而且血清的组成及含量通常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而存在差异。
牛血清主要成分有以下几类:
1、蛋白质类 包括白蛋白、球蛋白、α-巨球蛋白(抑制胰蛋白酶的作用)、胎球蛋白(促进细胞附着)、转铁蛋白(能结合铁离子,减少其毒性和被细胞利用)、纤维粘连素(促进细胞附着生长)等;
2、多肽类 主要是一些促进细胞生长和分裂的生长因子,最主要的生长因子是血小板生长因子,还有成纤维细胞生长因子、表皮细胞生长因子、神经细胞生长因子等,虽然在血清中含量很少,但对细胞的生长和分裂也起着重要作用;
3、激素类 激素对细胞的作用是多方面的。包括: 胰岛素:促进细胞摄取葡萄糖和氨基酸,与促细胞分裂有关; 类胰岛素生长因子:能与细胞表达的胰岛素受体结合,从而有胰岛素同样的作用: 促生长激素:促进细胞增殖的效应; 氢化可的松:血清中含有微量该成分,它可能具有促细胞贴附和增殖作用。但有人证明,血清中 的氢化可的松,在细胞密度较高时可能有抑制细胞生长和诱导细胞发生分化的作用。
4、其他成分 如氨基酸、葡萄糖、微量元素等。在合成培养基中这些成分的作用并不明显,与蛋白相结合的微量元素对细胞生长起促进作用。
科研实验中,细胞的体外培养一直是一个重要环节。细胞要养好,就要用好血清,如Ausbian®特级胎牛血清,它适合各种细胞培养,尤其适合难养细胞,如:干细胞、肝细胞,神经细胞,原代培养、细胞融合、转染细胞等。
二、牛血清在细胞培养基中的主要功能
牛血清是细胞培养中用量最大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,具有极为重要的功能。
1、提供能促使细胞指数生长的激素、基础培养基中没有或含量微小的营养物,以及某些低分子营养物质;
2、提供结合蛋白,识别维生素、脂类、金属离子,并与有毒金属和热源物质结合,起解毒作用;
3、是细胞贴壁、铺展生长所需因子的来源;
4、起酸碱度缓冲液作用;
5、提供蛋白酶抑制剂,细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受损伤。
三、牛血清的分类
根据牛出生时间和血清采制分离方法分为:
1、胎牛血清:八月龄胎牛心脏穿刺取血;
2、新生牛血清:出生12~24小时新生牛静脉采血; 高级新生牛血清:采血后静置自然析出的血清; 标准新生牛血清:经离心分离的血清; 普通新生牛血清:融血或微融血的血清; 3、小牛血清:出生三月龄小牛动脉采血分离血清;