细胞培养中支原体污染的有什么表现？

污染是细胞培养技术中面临的主要问题,细胞培养过程中一旦被支原体污染将很难清除。本文缔一生物/缔一生物为您分析支原体污染细胞的症状。

支原体污染细胞后.培养液可不发生混浊.多数情况下细胞病理变化轻微或不显著，细微变化也可由于传代、换液而缓解.因此易被忽视。但个别严重者，可致细胞增殖缓慢.甚至从培养器皿脱落。

症状1：细胞生长缓慢甚至死亡？

被广泛使用的细胞培养基，不仅给细胞提供支持和养分，对于支原体而言，也是天堂一般的存在。

与细胞培养高度重合的培养条件，注定了支原体要与细胞共同竞争有限的生存资源。

早有研究表明[1]，一些支原体（包括为常见的人型支原体、发酵支原体、精氨酸支原体等），通过精氨酸脱亚胺酶分解精氨酸来供能。当这些支原体混入细胞培养体系后，会与细胞争精氨酸，导致细胞「吃不饱饭」，出现营养不良的症状：生长速率异常、活力下降、易脱壁等等。

而精氨酸又是细胞组蛋白的重要组成成分，缺乏精氨酸会严重影响组蛋白合成，引起染色体断裂。再加上细胞处于长qi饥饿的状态，终导致细胞生长变慢甚至死亡。

支原体感染症状2：细胞变形、碎片增加、易聚团、有小黑点？

经过支原体的这一番操作，细胞结构已经被严重破坏，随之而来的就是细胞形态改变、细胞易聚团、大面积细胞凋亡制造的蛋白碎片（也就是培养基中的碎片和小黑点）

支原体也是如此——当培养体系中感染了支原体并大量繁殖的时候，会向外排放代谢产物，影响体系中的PH，加快培养基变黄的速度。

支原体感染症状3：培养基易变黄？

综上所述，如果你培养的细胞出现以下情况，基本可以确定是支原体感染了，不放心的话可以再配合支原体检测试剂（检测神器帮你揪出培养基中的支原体！）进一步确认。

除了影响细胞活力，支原体还会给细胞带来的几百种基因表达的改变,包括编码受体、离子通道、生长因子的基因和癌基因等方面[4]。它包含高度富含免疫原性的脂蛋白，可以锚定在胞膜的外表面，被TLR2等免疫细胞的受体识别。激活NF-kB途径，进一步导致细胞活化[5]，偏离终的实验结果。

Minerva Biolabs PCR Clean™

通过中和以及降解的原理，可快速有效地祛除任何物体表面的DNA、RNA以及DNA酶、RNA酶的污染，使它们快速的降解，从而确保PCR实验结果的准确。

使用方法也十分简单：

将PCR Clean™喷在操作台表面，反应1分钟后，即可用干净纸巾擦干试剂。

注：如果没有擦拭干净，液体挥发后表面可能有白色残留，影响美观。此时可用喷壶喷洒蒸馏水到白色残留处，然后擦拭即可。

针对移液器需要去除DNA污染，可按照说明书拆开移液器，将杆轴浸泡在PCR Clean™喷雾剂中，1分钟后取出后用水冲洗，晾干，重新组合。

PCR Clean™的优点：

1、快速：1分钟起效。

2、方便：喷雾剂可直接使用。

3、保护实验人员，避免接触DNA污染。

4、稳定性强：PCR Clean™耐热，可在室温保存至少一年。低温可能会形成沉淀，但在37℃迅速溶解。即使在65°C条件下存放两周，也不会影响喷雾剂的祛除效果。

5、成分安全：PCR Clean™含有少量的磷酸和乙氧基醇，成分非碱性，无致癌性。