在实验室的工作中,支原体污染会严重影响细胞实验结果,使生物制药工业产品的合格率下降。故对其的检测非常重要。支原体的检测方法有很多,培养法、DNA染色法、ELISA法,qPCR法等等。但是我们今天我们重点讲一讲qPCR法。
qPCR,顾名思义,就是在PCR的基础上加入荧光基团,通过荧光信号的变化的实时监测PCR的反应过程,最后通过对未知模板进行定量分析的方法。
荧光定量PCR法的出现,极大地简化了定量检测的过程。它具有以下几大特点:
1.时间短,2-3小时即可出结果;
2.灵敏度高、特异性强;
3.检测结果可定量;
4.操作简便,一台机器即可
在和被喻为“金标准"的培养法的比较中。qPCR法检测的时间短,只需两个半小时左右即可出其结果;培养法在分离培养中,虽然是支原体检测的“金标准",但是在支原体分离培养的过程中,要长出明显克隆需要7-29天,时间长而且操作较为复杂,没有办法满足实验的需求。
在此特别为大家推荐德国MB公司生产的支原体qPCR检测试剂盒,它具有高特异性,一次检测即可涵盖了所有可能感染细胞的支原体物种,操作简单,易于观察,而且具有高灵敏度,最高检测可达到≤10CFU/ml。