叶酸测定培养基中的叶酸是采用什么方法测定的
更新时间:2022-03-24 | 点击率:461
叶酸测定培养基的使用需确保不含有叶酸,其他营养齐全。若自行配制培养基,需确保原材料中不含有叶酸,制备过程不可污染叶酸。试验中使用的玻璃器具需洗净后在200℃烘至少2h,必要时可预先用1mol/L的稀盐酸浸泡再烘,充分去除容器中可能残留的叶酸。水的洁净程度对本试验至关重要,若水中有叶酸残留或接触了有叶酸残留的容器,将直接影响到试验结果。 叶酸测定培养基中的叶酸是采用什么方法测定的:
液相柱后衍生法利用叶酸经氧化剂氧化后具有荧光特性,采用柱后衍生法荧光检测器测定,大大提高了检测叶酸的灵敏度(较紫外检测提高了2个数量级),避免了使用离子对试剂伤害柱子且能够准确定量,本方法简单、快捷、灵敏,满足日常分析要求。
同位素放射免疫法对多谷氨酸叶酸反应的相对灵敏度有较大的差别,随着叶酸浓度增加,反应的相对灵敏度增加,但多谷氨酸叶酸的反应曲线不可能与单谷氨酸叶酸的反应曲线重合;另一方面,多谷氨酸叶酸与结合蛋白的亲合性与单谷氨酸叶酸相比较高,不同的单谷氨酸叶酸衍生物反应灵敏度不同,放射免疫法也不适用于检测单谷氨酸叶酸衍生混合物。该方法具有快速、简便的特点,同时由于叶酸放射免疫试剂盒的出现,很快得到普及,尤其广泛应用于临床实验室。但放射免疫法可用于检测和评价叶酸的营养状况,从定量检测的角度来讲,难以得到准确的叶酸质量分数值。
微生物测定法的特点是灵敏度高,样品中被测物量含量极低时也能被测出。样品处理简单,不需要一系列的提纯步骤,前处理操作步骤简单。微生物法是目前应用为广泛的,也是美国分析化学家协会的推荐方法,我国食品安全国家标准中关于婴幼儿食品和乳品中叶酸含量的测定,微生物法是测定叶酸的方法。