培养细胞为病毒的增殖提供了场所。
细胞是分离病毒最好和zui方便的基质,体外培养的细胞存在以下特点:
无抗体;不受到非特异拮抗物质的影响;对病毒的敏感性比体内细胞为高。
利用细胞培养进行病毒定性和定量,测定50%组织培养感染量(50%tissue culture infectious dose,FCID5o);
用于病毒感染及防治方面的研究:在制备减毒活疫苗和诊断用抗原时,细胞是病毒增殖的场所。
科学家指出:细胞培养技术是伴随着病毒学的发展而发展起来的。
采用离心感染法或提取病毒核酸进行感染,细胞打孔器协助感染可扩大病毒感染的宿主范围;
病毒感染指标易观察,光镜下可见细胞病变效应(cytopathic effect,cPE)、包涵体、细胞融合、血细胞吸附等现象,同时也便于用分子病毒学技术进行检测。
(二)细胞生物学
单个细胞克隆便于对细胞生物学的基础理论进行研究,如形态、结构、细胞器及其功能、遗传物质、核型、变异、细胞转化、生长周期等。
离体培养细胞便于进行环境因素、药物等单因素及多因素影响的研究,探索作用机制。
当今细胞生物学研究的热点
通讯和信号转导、增殖与细胞周期的调控、生长和分化、衰老和死亡以及干细胞的应用研究和细胞工程是以培养细胞学为基础,以细胞培养技术为手段和工具。
(三)细胞工程学
利用细胞融合及杂交技术,进行细胞工程的研究与开发。如生物反应器的开发研究,将编码某生物活性物质的基因导入动物受精卵,从这种受精卵发育的动物组织、体液分泌物中获得外源基因的表达产物。
(四)干细胞的培养
机体最原始细胞,具有较强的再生能力,在一定条件下可分化、增殖出各类细胞。
干细胞的数量极少,故需分离、保存并在体外大量培养,长成各种组织和器官。主要集中在造血干细胞、胚胎干细胞和神经干细胞上,已成为干细胞研究的首要课题。
(五)淋巴细胞培养技术的应用
在培养环境中,淋巴细胞受某些生长因子的刺激,出现旺盛的分裂、增殖。淋巴细胞培养的成功对反映机体免疫功能状况起很大作用,如研究细胞标记,检测T、B细胞数量及功能,检测T细胞亚群(CD3、CD8、CD4.等细胞)的变化。
(六)遗传性疾病的产前检查
羊膜穿刺术获得羊水中的胎儿细胞进行培养,在妊娠早期诊断胎儿是否患有先天性遗传病。
少量胎儿脱落细胞是能分裂的,经2—4周生长,形成显著单层上皮样细胞,可按常规制备染色体。
检测甲胎蛋白(alpha—fetoprotein,AFP)等,产前检测出几十种代谢病与遗传病,较准确地指导优生优育。
(七)毒性实验及生物实验的工具
培养细胞学对化学物质、放射线、激素、药物等提供了最简易而又可靠的方法,并对毒性机制研究提供了良好的实验对象。对肿瘤细胞进行抗癌药物的药敏测试,以指导临床抗癌药物的使用及配伍。
(八)在现代生物技术中应用
基因分离、基因测序与表达、基因转移与重组、癌基因研究等。
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