肿瘤细胞在体外不易生长,那我们该如何培养好肿瘤细胞呢?
取材、成纤维细胞排除,培养液和培养底物。
(1)取材:尽量避免取退变组织,癌性转移淋巴结、胸腹水是好的培养材料,组织尽快培养,如不能立即培养,可贮存于4℃,不宜超过24小时。
(2)培养基的选择:
RPMI1640、DMEM、mc-coy5A
有些肿瘤细胞需要生长因子,如乳腺癌细胞。
注意:含有血清和相关生长因子更易培养成功。
(3)成纤维细胞的排除
成纤维细胞>肿瘤细胞的生长。
机械刮除法:
标记肿瘤细胞生长的范围(画圈),刮除直至*刮除掉为止 。
反复贴壁法:
不加血清培养液,把含有两类细胞的悬液反复贴壁使两类细胞相互分离。
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