进口弯曲菌显色培养基使用方法和使用时的注意事项
更新时间:2022-05-18 | 点击率:420
进口弯曲菌显色培养基蛋白胨和酵母膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;蔗糖为可发酵的糖类;抑菌剂抑制大部分非弧菌细菌,氯化钠可维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;混合色素与副溶血性弧菌、霍乱弧菌和创伤弧菌所对应的酶发生特异性反应,水解底物,释放出显色基团,在淡黄色平板上产生品红色菌落(副溶血性弧菌)和绿-蓝绿色的菌落(霍乱弧菌和创伤弧菌)。
进口弯曲菌显色培养基的使用方法
1、取瓶内弧菌显色培养基干粉71.3克,用1000ml蒸馏水或纯水溶解,可按比例扩增或缩小。搅拌加热煮沸至*溶解,不需高压灭菌,冷至约50℃,倾注灭菌平皿。
2、以无菌操作取检样25g(mL),加入3%氯化钠碱性蛋白胨水225mL,用旋转刀片式均质器以8000r/min均质1min,或拍击式均质器拍击2min,或用Pulsifier脉冲式样品处理器均质30秒,制备成1:10的均匀稀释液。如无均质器,则将样品放入无菌乳钵中磨碎,然后放在500mL的灭菌容器内,加225mL3%氯化钠碱性蛋白胨水,并充分振荡。
3、增菌:将上述1:10稀释液于36±1℃培养8~18h。
4、分离:在增菌液中用接种环取一环,于弧菌显色平板上划线分离,于36±1℃培养18~24h。5、通过验证试验进一步确认假定性副溶血性弧菌和其他弧菌,如氧化酶、革兰氏染色、生化鉴定等。进一步的试验。
进口弯曲菌显色培养基的注意事项
1.称量时注意粉尘,佩戴口罩操作以避免引起呼吸道系统不适。
2.干粉培养基使用后立即旋紧瓶盖,避免吸潮结块。
3.自制平板时需注意培养基的厚度,厚度过薄容易造成琼脂水分保持性下降,开裂;因此,一般需要15-20mL(Φ90mm)体积培养基,平板培养基厚度至少为2mm。
4.即用型成品平板应该尽量保持在2-8℃下保存且与存放容器冷凝管保持一定距离以避免冻损坏。产品多次在低温与常温之间变更会引起琼脂的泌水,属于正常现象。使用前应平衡至室温且尽量在无菌干燥箱中预干燥。