每一个实验新手们刚进实验室操作细胞,都是紧张兴奋又手忙脚乱,就从最基本的养细胞来说,大家刚开始一定觉得理论知识看起来很容易,但是,在实际情况中一般是这样的——“到底怎么回事,细胞长不好/细胞又死了/又污染了......"
这时,如果有一份靠谱的细胞培养经验总结,或许可以帮助你少走弯路,今天就为大家分享一下由我们实验室总结的细胞培养过程中的知识总结,让你事半功倍。
首先,我们来看看,什么是细胞培养:
细胞培养是指细胞在体外的培养技术,即在无菌条件下,从机体中取出组织或细胞,模拟机体内正常生理状态下生存的基本条件,让它在培养皿中继续生存、生长和繁殖的方法。通过细胞培养我们可以获得大量的、性状相同的细胞,以便于研究细胞的形态结构、化学组成及功能和机制。
细胞真的很脆弱,就像小婴儿一样,需要你无微不至的关怀。
培养细胞之前,你需要做好这些准备:
1、耗材的处理、
玻璃器皿的清洗,对于玻璃器皿(细胞瓶、装营养液的瓶子、小青霉素瓶等)要用洗衣粉刷干净(注意死角),然后冲干净。用酸液浸泡 24 h 以上,之后用清水冲洗数遍,除去残留酸液。瓶子之类,冲洗过程要使劲摇晃。
2、试剂的配置
试剂配置,细胞培养用的液体一般使用双蒸以上的水即可。并注意 pH 值的调节。
3、无菌检验
无菌检验,主要采用过滤除菌:如胰酶、抗生素、G-418 溶液、各类培养基、丙酮酸钠、谷氨酰胺等。有些可以采用高压灭菌:如 PBS、D-Hank's等。
不同细胞对培养基的要求是不同的,要根据自己的细胞要求使用。
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